欧盟体外诊断产品指南

欧盟体外诊断产品指令98/79/EC的一个关键内容是体外诊断产品的可追溯性要求：“校准物质和/或质量控制物质的可追溯性必须由现有的高水平参考方法保证和/或参考物质”。这些准则是成员国必须执行的法律文书。欧盟体外诊断产品指南的实施意味着体外诊断产品价值的可追溯性被提升到了法律高度。 1999年，国际标准化组织（ISO）起草了5个相关ISO标准文件，以配合欧盟体外诊断产品指南的实施。其中，与制造商和临床实验室密切相关的是ISO/CD 17511《校准物质和质量控制物质值的计量溯源》和ISO/CD 18153《酶浓度校准物质和质量控制物质值的计量溯源》 。鉴于这些欧盟指南和 ISO 标准的出现及其潜在的国际影响，美国计量权威机构美国国家标准与技术研究所 (NIST) 与国家临床实验室标准委员会 (NCCLS) 合作，在疾病控制和预防中心 (CDC)、先进医疗技术协会 (AdvaMed)、病理学会 (CAP) 和临床化学学会 (AACC) 的支持下，我们召集了来自以下国家的专家小组：美国和欧洲讨论临床实验室测试和体外诊断测试系统的可追溯性。此次研讨会的目的是展示价值追溯的必要性，以便制造商执行国际标准，提高临床检测数据的可比性，从而促进临床诊断和治疗的有效性。

1. 数量价值的可追溯性

ISO 将可追溯性定义如下：一种属性，使测量结果或标准值能够通过连续的比较链（通常是国家或国际标准）链接到给定的标准，链中每个比较步骤都具有给定的不确定性。

溯源性是解决测量结果的正确性问题，即测量平均值与真值的一致程度。理论上的可追溯性并不能解决超出正确性的测量质量问题。

目前，临床检测值的溯源要求主要体现在两个方面，一是产品的校准值，二是临床检测结果，分别是产品生产企业和临床实验室。目前，大多数临床实验室都使用商业试剂盒，因此企业生产的校准产品的可追溯性更加重要。欧盟体外诊断产品指南以及ISO17511和ISO18153的可追溯性要求是针对制造商的。该指南要求“标准品或校准品的测定必须通过现有的更高水平的参考测量程序和/或参考物质，以确保其可追溯性”。

二、数量溯源链的结构及工作原理

临床检验的定量溯源可能有不同的模式，但其核心内容是将每种测量方法的测量值与公认的标准相关联。样品或校准物质测量结果的溯源性是通过一系列比较测量建立的，其中测量的测量过程和校准特性以从低到高的连续链（溯源链）进行测量。链的顶部是国际单位制 (SI)（基本或派生单位）。第一级参考测量过程是具有最高计量特性的参考测量过程。它必须基于特定的、低不确定性的测量原理，可以追溯到 SI 单位，而无需进行相同量的校准。目前，只有同位素稀释/质谱（ID/MS）、库仑、粒度、滴定和依数（冰点降低）测量被认为适用于一级参考测量过程。主要参考物质是测量单位的体现，具有尽可能低的测量不确定度。它可以通过初级参考测量过程直接测定，也可以通过可靠的杂质分析间接测定。主要参考物质通常是高纯度的待测物质。二级参考测量过程是经过充分论证且其不确定度能够满足特定要求的测量过程，可用于下级测量过程的评价和参考物质的鉴别。二级参考测量过程用一级参考材料进行校准。一级和二级标准物质一般是经计量部门或行政部门认证的标准标准物质（CRM）。

三．临床实验室参考系统现状

临床测试样本是具有高度复杂性的生物样本。目前，大约有400至600项临床试验，只有25至30项可以追溯到SI单位。它们主要是化学性质明确的小分子化合物。包括电解质物质（如钾、钠、氯、镁、钙、锂离子等）、代谢物（如胆固醇、甘油三酯、葡萄糖、肌肝、尿酸、尿素等）以及一些类固醇激素和甲状腺荷尔蒙。这些项目虽然数量不多，但却构成了常规临床检测项目的主要组成部分。

除上述少数项目外，其他大部分临床检测项目由于被测物质（主要是生物大分子）的复杂性，建立一级参比测定流程和制备一级参比物质都非常困难。 ）（如混合物、异构体等），其价值可追溯性只能停留在较低水平。此类检查项目目前国际上有以下几种方式，是一种国际参考测量程序（不是初级参考测量程序），定值也有用国际标准物质的参考测量过程，如血红蛋白a1c ，另一种是国际参考测量过程，一扫参考物质，大约有30个检验项目属于这种情况：第三种情况是有国际参考物质和定值方案，但没有国际参考测量流程中，约250个检验项目属于本案；其他约 300 个国家没有国际参考测量流程或参考材料。

用于上述可溯源至 SI 单位的测试的先进参考系统（初级和次级参考测量过程、初级标准物质和高精度基质标准物质）大多由 NIST、DCKC 和 BCR 建立和维护。也有一些大学、医院、研究机构和专业实验室的厂家建立了自己的参考测量流程，从事参考测量工作多年，达到较高的计量水平。无法溯源至SI单位的检测项目的参考系统（主要是参考物质）主要来自相关国际组织，如世界卫生组织（WHO）、国际临床化学学会（IFCC）等。部分测量过程和物质有可能成为国际一级参考测量过程和一级参考物质。

目前我国按乙型肝炎病毒表面抗原定量测定的药品管理试剂盒和乙型肝炎病毒表面抗体定量测定的标准试剂盒是由世界卫生组织（WHO）制定的标准，中国药科院和生物制品检定建立二级标准并追溯至WHO，生产企业建立自己的标准，并必须追溯至中国药品生物制品检定所检测。

作为提高检测质量的重要手段，检测结果的可追溯性越来越受到重视。检测结果的可追溯性可能成为体外诊断试剂和临床实验室检测生产中的重要质量指标。体外诊断试剂研发者应高度重视临床检验的可追溯性。在开发定量测定试剂盒之初，应充分考察与测定项目相关的标准产品的溯源性，并认真研究相关文献，如ISO/CD 17511、ISO 18153，从而真正提高产品的质量水平发达。